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液相色譜儀的操作主要分5個(gè)步驟

更新時(shí)間:2023-02-14        閱讀:4639
  液相色譜儀根據(jù)固定相是液體或是固體,又分為液-液色譜(LLC)及液-固色譜(LSC)。現(xiàn)代液相色譜儀由高壓輸液泵、進(jìn)樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、檢測(cè)器、信號(hào)記錄系統(tǒng)等部分組成。與經(jīng)典液相柱色譜裝置比較,具有高效、快速、靈敏等特點(diǎn)。
 

 

  液相色譜儀的用途:
  1、在聚合物的分析中,吸附色譜一般用來(lái)分離添加劑,如偶氮染料、抗氧化劑、表面活性劑等,也可用于石油烴類的組成分析。
  2、用于氨基酸、蛋白質(zhì)的分析,也適合于某些無(wú)機(jī)離子(NO3-、SO42-、Cl-等無(wú)機(jī)陰離子和Na+、Ca2+、Mg2+、K+等無(wú)機(jī)陽(yáng)離子)的分離和分析,具有十分重要的作用。
  3、適用于水溶液的體系,又適用于有機(jī)溶劑的體系。當(dāng)所用的洗脫劑為水溶液時(shí),稱為凝膠過(guò)濾色譜,其在生物界的應(yīng)用比較多。
 
  液相色譜儀的操作步驟:
  1、準(zhǔn)備:
  ①準(zhǔn)備所需流動(dòng)相,用合適的0.45濾膜過(guò)濾,超聲脫氣20min;
  ②根據(jù)待測(cè)樣品的需要更換合適的色譜柱(注意方向)和定量環(huán);
  ③配制樣品的標(biāo)準(zhǔn)溶液,用合適的0.45um濾膜過(guò)濾;
  ④檢查儀器各部件是否連接正常,其中包括電源線、數(shù)據(jù)線、地線以及輸液管道。
 
  2、開機(jī):
  ①接通電源,一次打開檢測(cè)器、輸液泵,待檢測(cè)器自檢結(jié)束,顯示測(cè)量狀態(tài)時(shí)再打開電腦、打印機(jī)及電腦顯示器等;
  ②更換流動(dòng)相并排氣泡;
  ③將管路的不銹鋼過(guò)濾頭放入裝有準(zhǔn)備好的流動(dòng)相儲(chǔ)液瓶中;
  ④逆時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng)泵的排空閥,約半圈,之后擰松排空閥;
  ⑤按輸送泵(purge)鍵,綠燈亮?xí)r開始以5.0ml/min流速?zèng)_洗約2分鐘,管路無(wú)氣泡時(shí)按下(stop)鍵,重新設(shè)定流速值。
 
  3、設(shè)計(jì)參數(shù):
  ①流速設(shè)定
  ②波長(zhǎng)設(shè)定
  ③設(shè)定完成按運(yùn)行(run)按鍵
  ④色譜工作站操作:依次執(zhí)行→打開“在線工作站”→“通道1”→“OK”→“數(shù)據(jù)采集”后進(jìn)行零點(diǎn)校正、查看基線,確定基線穩(wěn)定后關(guān)閉查看基線可以進(jìn)樣。
  進(jìn)樣后進(jìn)行采集、預(yù)覽、查看結(jié)果、打印
 
  4、進(jìn)樣:
  ①進(jìn)樣前將(A/Z)檢測(cè)器按鍵調(diào)零查看基數(shù)是否在0mv,有偏差則(零點(diǎn)校正)按鍵進(jìn)行調(diào)試
  ②用樣品清洗注射器、排除氣泡、抽取適量后將手動(dòng)進(jìn)樣閥桿調(diào)到位置,樣品注入進(jìn)樣閥后調(diào)到(Inject)位置,以此進(jìn)樣操作步驟完成,進(jìn)入在線工作站自動(dòng)采集數(shù)據(jù)流程。
 
  5、系統(tǒng)清洗:
  由于分析樣品時(shí)流動(dòng)相系統(tǒng)中含有緩沖鹽類物質(zhì),需使用10%甲醇水溶液,以1.0ml/min沖洗40分鐘后更換甲醇試劑,以同樣1.0ml/min沖洗40分鐘,停泵,關(guān)機(jī)。

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