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操作二元高压梯度系统的细节有几点

更新时间:2025-03-04        阅读:1009
  二元高压梯度系统是一种高效、精准的分离分析技术,广泛应用于多个领域。通过正确使用该系统,可以显著提高分析的准确性和可靠性,为科研工作者提供强有力的支持。以下是二元高压梯度系统的使用细节:
  1. 系统组成与连接:
  - 高压泵:通常有两个独立工作的高压泵,分别用于输送不同的溶剂。高压泵采用双柱塞杆串联设计、凸轮驱动、悬浮式柱塞导向及数字脉动阻尼器等,确保输液脉动小、运行平稳,进口高质量柱塞杆和密封圈提高了其稳定性和耐用性。
  - 梯度混合器:位于两个高压泵之后,根据预设的梯度程序,自动调整两种流动相的比例,实现流动相组成的连续变化。其精确控制能保证梯度的精度和重现性。
  - 色谱柱:内填充有特定的固定相,与流动相中的样品组分发生相互作用,使不同组分因相互作用力不同而在色谱柱中的移动速度产生差异,从而实现分离。
  - 检测器:如UV紫外检测器,用于检测分离后的组分,提供准确的分析结果。
  - 工作站:控制整个系统的运行,包括泵、检测器、柱温箱等,具有强大的数据处理功能,可轻松实现泵及检测器的控制、灵活的报告输出模式,满足用户多角度的使用需求。
  2. 操作步骤:
  - 开机准备:依次打开计算机、二元高压梯度系统的电源,等待系统初始化完成。同时检查溶剂托盘内的溶剂是否充足,各连接管路是否紧密无泄漏。
  - 设定参数:在工作站软件上设置所需的流动相比例、流量、梯度程序、柱温、检测波长等参数。例如,根据待分离样品的性质和分析要求,确定初始流动相比例、梯度变化的时间范围和斜率等。
  - 排气操作:打开排液阀,以较低的流速排出系统中的空气,防止空气对分析结果产生影响。待气泡排除后,关闭排液阀。
  - 平衡系统:以设定的初始流动相比例冲洗系统一段时间,使色谱柱达到平衡状态。这一步骤对于获得稳定的基线和准确的分析结果至关重要。
  - 进样分析:将待测样品通过进样口注入系统,开始进行分析。在分析过程中,密切观察工作站软件上的色谱图和相关数据,确保分析过程正常进行。
  - 清洗维护:分析完成后,用适当的溶剂清洗系统,去除残留的样品和流动相,防止污染系统和影响下一次分析。定期对系统进行维护和保养,如更换密封圈、清洗过滤器、校准检测器等,以保证系统的性能和稳定性。
  3. 注意事项:
  - 溶剂选择:根据样品的性质和分析目的选择合适的流动相溶剂,确保溶剂的纯度和兼容性。同时要注意溶剂的毒性和挥发性,避免对操作人员和环境造成危害。
  - 压力监控:在系统运行过程中,实时监控压力变化。如果压力异常升高或波动较大,可能是由于管路堵塞、柱塞杆故障等原因引起的,应立即停止运行,检查并排除故障。
  - 温度控制:保持柱温的稳定对于获得良好的分离效果很重要。柱温的变化会影响样品在色谱柱上的保留时间和分离效率,因此要确保柱温箱的温度控制准确可靠。
  - 梯度精度:二元高压梯度系统的梯度精度对于复杂样品的分离至关重要。在使用前应对系统进行梯度校准,确保实际的梯度比例与设定值相符。在分析过程中,避免突然改变梯度条件,以免影响分离效果。

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